တိကျမှုမြင့်မားသော တူရိယာတစ်ခုအနေဖြင့်၊ HPLC ကိုအသုံးပြုနေစဉ်အတွင်း မှန်ကန်သောနည်းလမ်းဖြင့် မလုပ်ဆောင်ပါက ပြဿနာအသေးအမွှားအချို့ကို အလွယ်တကူ ဖြစ်ပေါ်စေနိုင်သည်။အဖြစ်များဆုံးပြဿနာတစ်ခုမှာ ကော်လံချုံ့ခြင်းပြဿနာဖြစ်သည်။မှားယွင်းနေသော chromatograph ကို အမြန်ဖြေရှင်းနည်း။HPLC စနစ်တွင် အဓိကအားဖြင့် လှောင်ပုလင်း၊ ပန့်တစ်လုံး၊ ထိုးဆေး၊ ကော်လံတစ်ခု၊ ကော်လံအပူချိန်အခန်း၊ ထောက်လှမ်းကိရိယာနှင့် ဒေတာလုပ်ဆောင်ခြင်းစနစ်တို့ ပါဝင်သည်။စနစ်တစ်ခုလုံးအတွက်၊ တိုင်များ၊ ပန့်များနှင့် ထောက်လှမ်းကိရိယာများသည် အဓိကအစိတ်အပိုင်းများနှင့် ပြဿနာများဖြစ်နိုင်ခြေရှိသော အဓိကနေရာများဖြစ်သည်။
ကော်လံဖိအားအတွက် သော့ချက်မှာ HPLC ကိုအသုံးပြုသည့်အခါ အနီးကပ်အာရုံစိုက်ရန်လိုအပ်သည့် ဧရိယာဖြစ်သည်။ကော်လံဖိအား၏တည်ငြိမ်မှုသည် chromatographic peak ပုံသဏ္ဍာန်၊ ကော်လံထိရောက်မှု၊ ခွဲထုတ်ခြင်းထိရောက်မှုနှင့် ထိန်းသိမ်းမှုအချိန်တို့နှင့် နီးကပ်စွာဆက်စပ်နေသည်။ကော်လံဖိအားတည်ငြိမ်မှုသည် ဖိအားတန်ဖိုးသည် တည်ငြိမ်သောတန်ဖိုးတွင် တည်ငြိမ်သည်ဟု မဆိုလိုပါ၊ သို့သော် ဖိအားအတက်အကျအကွာအဝေးသည် 345kPa သို့မဟုတ် 50PSI အကြားဖြစ်သည် (ကော်လံဖိအားတည်ငြိမ်ပြီး ဖြည်းညင်းစွာပြောင်းလဲသောအခါ gradient elution ကိုအသုံးပြုရန်ခွင့်ပြုသည်)။ဖိအားများလွန်းခြင်း သို့မဟုတ် နိမ့်လွန်းခြင်းသည် ကော်လံဖိအားပြဿနာတစ်ခုဖြစ်သည်။
HPLC ချို့ယွင်းချက်များနှင့် ဖြေရှင်းချက်များအတွက် ဖြစ်နိုင်ခြေအရှိဆုံး
1၊ မြင့်မားသောဖိအားသည် HPLC ကိုအသုံးပြုရာတွင် အဖြစ်အများဆုံးပြဿနာဖြစ်သည်။ဆိုလိုသည်မှာ ဖိအားများ ရုတ်တရက် တက်လာခြင်း ဖြစ်သည်။ယေဘူယျအားဖြင့် အောက်ပါ အကြောင်းအရင်းများ ရှိပါသည်။ဒီအခါမှာ ကျွန်တော်တို့က အဲဒါကို ပိုင်းခြားစိတ်ဖြာပြီး စစ်ဆေးသင့်တယ်။aပထမဦးစွာ ဖုန်စုပ်စုပ်စက်၏ ဝင်ပေါက်ကို ဖြတ်ပါ။ဤအချိန်တွင် PEEK tube သည် အရည်များပြည့်နေသဖြင့် PEEK tube သည် အရည်များ အလိုအလျောက် ရွှဲသွားခြင်းရှိမရှိ သိနိုင်ရန် PEEK ပြွန်ထက် သေးငယ်သွားစေရန်။အရည်မရွှဲလျှင် သို့မဟုတ် ဖြည်းညှင်းစွာ ရွှဲနေပါက၊ သံလွင်ဇကာခေါင်းကို ပိတ်ဆို့ထားသည်။ကုသမှု- 30% နိုက်ထရစ်အက်ဆစ်ကို နာရီဝက်ကြာစိမ်ပြီး အလွန်သန့်စင်သောရေဖြင့် ဆေးချပါ။အရည်များ ကျပန်းကျလျှင်၊ အရည်စစ်ထုတ်စက်သည် ပုံမှန်ဖြစ်ပြီး စစ်ဆေးနေပါသည်။ခမိုဘိုင်းအဆင့်သည် ကော်လံကိုမဖြတ်သန်းနိုင်အောင် Purge valve ကိုဖွင့်ပြီး ဖိအားကို သိသိသာသာမလျှော့ချပါက၊ ဇကာအဖြူခေါင်းကို ပိတ်ဆို့ထားသည်။ကုသခြင်း- စစ်ထုတ်ထားသော အဖြူရောင်ခေါင်းများကို ဖယ်ရှားပြီး နာရီဝက်ကြာ 10% isopropanol ဖြင့် အသံသွင်းထားသည်။ဖိအား 100PSI အောက်တွင် ကျဆင်းသွားသည်ဟု ယူဆပါက စစ်ထုတ်ထားသော အဖြူရောင်ခေါင်းသည် ပုံမှန်ဖြစ်ပြီး စစ်ဆေးနေပါသည်။ဂ။ဖိအားမကျဆင်းပါက ကော်လံ၏အထွက်အဆုံးကို ဖယ်ရှားပါ။ကုသမှု- ဆားကြားခံဆားပိတ်ဆို့နေပါက ဖိအားပုံမှန်ဖြစ်သည်အထိ 95% ကို ဆေးကြောပါ။ပိုမိုမြင့်မားသောထိန်းသိမ်းထားသောပစ္စည်းအချို့ကြောင့် အဟန့်အတားဖြစ်စေပါက၊ လက်ရှိမိုဘိုင်းအဆင့်ထက် ပိုမိုအားကောင်းသောစီးဆင်းမှုကို ပုံမှန်ဖိအားဆီသို့ အလျင်အမြန်အသုံးပြုသင့်သည်။အထက်ပါနည်းလမ်းအတိုင်း ရေရှည်သန့်ရှင်းရေးဖိအားမကျဆင်းပါက၊ ကော်လံ၏အဝင်နှင့်ထွက်ပေါက်ကို ဆန့်ကျင်ဘက်တွင် ကိရိယာနှင့်ချိတ်ဆက်ထားသည်ဟု ယူဆနိုင်ပြီး ကော်လံကို မိုဘိုင်းအဆင့်ဖြင့် သန့်စင်နိုင်ပါသည်။ယခုအချိန်တွင် ကော်လံဖိအားကို မလျှော့ချပါက ကော်လံဝင်ပေါက် ဆန်ခါပြားကိုသာ အစားထိုးနိုင်သော်လည်း လည်ပတ်မှု မကောင်းပါက၊ ကော်လံအကျိုးသက်ရောက်မှုကို လျှော့ချရန် လွယ်ကူသောကြောင့် လျှော့သုံးကြည့်ပါ။ခက်ခဲသောပြဿနာများအတွက် ကော်လံအစားထိုးခြင်းကို ထည့်သွင်းစဉ်းစားနိုင်ပါသည်။
(2) မမှန်ကန်သော စီးဆင်းနှုန်းသတ်မှတ်ခြင်း- မှန်ကန်သော စီးဆင်းနှုန်းကို ပြန်လည်သတ်မှတ်နိုင်သည်။
(၃) မမှန်ကန်သော စီးဆင်းမှုအချိုးအစား- မတူညီသော စီးဆင်းမှုအချိုးအစားများ၏ ပျစ်ရည်ညွှန်းကိန်း ကွဲပြားသည်၊ စီးဆင်းမှု၏ သက်ဆိုင်သောစနစ်ဖိအားသည်လည်း ပိုကြီးသည်။ဖြစ်နိုင်ပါက၊ ပျော့ပျောင်းသော အရည်ပျော်ရည်များကို အစားထိုး သို့မဟုတ် ပြန်လည်သတ်မှတ်ပြီး ပြင်ဆင်နိုင်သည်။
(4) စနစ်ဖိအား သုညပျံ့လွင့်မှု- အရည်အဆင့်အာရုံခံကိရိယာ၏ သုညကို ချိန်ညှိပါ။
2, ဖိအားအလွန်နိမ့် (1) အများအားဖြင့်စနစ်ယိုစိမ့်ကြောင့်ဖြစ်ရတဲ့ဖြစ်ပါတယ်။လုပ်ဆောင်ရမည့်အရာ- ချိတ်ဆက်မှုတစ်ခုစီ၊ အထူးသဖြင့် ကော်လံအဆုံးနှစ်ဖက်ရှိ အင်တာဖေ့စ်ကိုရှာပါ၊ ယိုစိမ့်ဧရိယာကို တင်းကျပ်ပါ။ပို့စ်ကိုဖယ်ရှားပြီး PTFE ဖလင်ကို သင့်လျော်သောအင်အားဖြင့် တင်းကျပ်ခြင်း သို့မဟုတ် စည်းပါ။
(၂) ဓာတ်ငွေ့သည် ပန့်ထဲသို့ ဝင်လာသော်လည်း ဤအချိန်တွင် ဖိအားများသည် များသောအားဖြင့် မတည်ငြိမ်ဘဲ မြင့်သည်နှင့် နိမ့်သည်။ပိုလေးနက်တာက စုပ်စက်က အရည်တွေကို စုပ်ယူနိုင်မှာ မဟုတ်ပါဘူး။ကုသမှုနည်းလမ်း- သန့်ရှင်းရေးအဆို့ရှင်ကိုဖွင့်ပြီး စီးဆင်းမှုနှုန်း 3 ~ 5ml/min ဖြင့် သန့်စင်ပါ။မဟုတ်ပါက၊ သီးသန့်ဆေးထိုးအပ်ပြွန်ကို အသုံးပြု၍ အိတ်ဇောပိုက်တွင် လေပူဖောင်းများကို စွန့်ထုတ်သည်။
(၃) မိုဘိုင်းအဆင့်ထွက်ပေါက်မရှိပါ- ရေလှောင်ပုလင်းအတွင်း မိုဘိုင်းအဆင့်ရှိမရှိ၊ စုပ်ခွက်သည် မိုဘိုင်းအဆင့်တွင် နှစ်မြုပ်ထားခြင်းရှိမရှိ၊ စုပ်စက်လည်ပတ်နေခြင်းရှိမရှိ စစ်ဆေးပါ။
(4) ရည်ညွှန်းအဆို့ရှင် မပိတ်ပါ- ရည်ညွှန်းအဆို့ရှင်သည် အရှိန်လျော့ပြီးနောက် ပိတ်သွားပါသည်။များသောအားဖြင့် 0.1 သို့ ကျဆင်းသွားသည်။ရည်ညွှန်းအဆို့ရှင်ကိုပိတ်ပြီးနောက် ~ 0.2mL/မိနစ်။
အနှစ်ချုပ်-
ဤစာတမ်းတွင်၊ liquid chromatography တွင်သာမန်ပြဿနာများကိုခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာသည်။ကျွန်ုပ်တို့၏လက်တွေ့အသုံးချမှုတွင် အခြားပြဿနာများကို ကျွန်ုပ်တို့ကြုံတွေ့ရပေလိမ့်မည်။အမှားအယွင်းများကို ကိုင်တွယ်ရာတွင်၊ ကျွန်ုပ်တို့သည် အောက်ပါအခြေခံမူများကို လိုက်နာသင့်သည်- တွေးခေါ်မှုဆိုင်ရာအချက်နှင့် ပြဿနာကြားဆက်နွယ်မှုကို ဆုံးဖြတ်ရန် တစ်ကြိမ်လျှင် အချက်တစ်ချက်ကိုသာ ပြောင်းလဲပါ။ယေဘူယျအားဖြင့်၊ ပြဿနာဖြေရှင်းရန်အတွက် အစိတ်အပိုင်းများကို အစားထိုးသည့်အခါ၊ စွန့်ပစ်ထားသော စွန့်ပစ်ပစ္စည်းများကို စွန့်ပစ်ပစ္စည်းများကို ကာကွယ်ရန် နေရာတွင် ပြန်လည်ထားရှိရန် ဂရုပြုသင့်သည်။ကောင်းမွန်တဲ့ မှတ်တမ်းအလေ့အထတစ်ခု ထူထောင်ခြင်းဟာ အမှားအယွင်းတွေကို ကိုင်တွယ်ဖြေရှင်းခြင်းရဲ့ သော့ချက်ဖြစ်ပါတယ်။နိဂုံးချုပ်အနေဖြင့်၊ HPLC ကိုအသုံးပြုသောအခါ၊ နမူနာကြိုတင်ပြုပြင်ခြင်းနှင့် စက်ကိရိယာများ၏ မှန်ကန်သောလည်ပတ်မှုနှင့် ထိန်းသိမ်းခြင်းတို့ကို ဂရုပြုရန် အရေးကြီးပါသည်။
တင်ချိန်- စက်တင်ဘာ-၁၈-၂၀၂၃