၎င်းသည် peptides များပေါ်တွင်တည်ရှိသော phosphorylating Tyrr, Ser, Thr သည် သက်ရှိဖြစ်စဉ်များတွင် အရေးပါသောအခန်းကဏ္ဍမှပါဝင်သည်။phosphorylated amino acid ကို ဖော့စဖောရစ်အက်ဆစ် peptide ထုတ်လုပ်မှုတွင် အများအားဖြင့် အသုံးပြုကြပြီး၊ လက်ရှိတွင် တစ်ခုတည်းသော ဖီးနဲလ် ဖော့စဖိုရတ် အမိုင်နိုအက်ဆစ်များတွင် အသုံးပြုသည်။HBTU/phosphorylated amino acids များကို phosphorylated amino acids HOBt/DIEA နည်းလမ်းဖြင့် ချိတ်ဆက်ရန် မကြာခဏအသုံးပြုကြသည်၊ သို့သော် phosphoric acid peptide သည် ဤချဉ်းကပ်မှုဆိုင်ရာ ချို့ယွင်းချက်များကို ရွေးချယ်နေကြသည်၊ အထူးသဖြင့် ထုတ်လုပ်ထားသော ပိုရှည်သော peptide peptides သို့မဟုတ် amino acid phosphate ကိုချိတ်ဆက်ရာတွင် ထိရောက်မှုနည်းသည်၊ နိမ့်သည်၊ နောက်ဆုံးထုတ်ကုန်၏သန့်ရှင်းစင်ကြယ်။ဤ phosphopeptide အတွက်၊ ကျွန်ုပ်တို့သည် ရွေးချယ်ထားသော post-phosphorylation ချဉ်းကပ်နည်းကို စဉ်းစားခဲ့သည်။မျိုးဆက်လုပ်ငန်းစဉ်သည် peptide ပေါင်းစပ်ပြီးနောက်တံဆိပ်တပ်ရန်လိုအပ်သောအမိုင်နိုအက်ဆစ်ဘေးထွက်ကွင်းဆက်အကာအကွယ်အုပ်စုများကိုရွေးချယ်ဖယ်ရှားခြင်းဖြစ်သည်။Tyr အတွက်၊ Thr သည် အမိုင်နိုအက်ဆစ်များကို အကာအကွယ်မရှိသော ဘေးထွက်ကြိုးများဖြင့် တိုက်ရိုက်တုံ့ပြန်နိုင်သည်။-Ser (trt)၊ 1%TFA /DCM ပတ်၀န်းကျင်တွင် အရေအတွက်အားဖြင့် ဖယ်ရှားသည်။
နှစ်ဆ benzene phosphite phosphoramide နှင့် နိုက်ထရိုဂျင် လေးခုပါရှိသော Phosphorylation နှင့် phosphoramide tetrazolium active intermediates သည် hydroxy နှင့် ချိတ်ဆက်ပြီးနောက် အက်ဆစ်ပါအောက်ဆိုဒ် ဓာတ်တိုးခြင်း phosphoryl ဖွဲ့စည်းမှုအောက်တွင် ပြီးပြည့်စုံသော တုံ့ပြန်မှု။
လက်ရှိတွင်၊ peptide phosphorylated ပြုပြင်မွမ်းမံခြင်းနည်းလမ်းတွင်အဓိကအမျိုးအစားနှစ်မျိုးရှိသည်။
(1) အလယ်အလတ်အာမခံထားသော phosphorylated အမိုင်နိုအက်ဆစ်များကို polypeptide အစီအစဉ်သို့ တိုက်ရိုက် မိတ်ဆက်ခြင်း၊
(2) အစေးထုတ်ပေးပြီးနောက် peptide sequence မှ side chain hydroxyl ၏ Ser၊ Tyr သို့မဟုတ် Thr phosphorylation သို့။
1) အလယ်အလတ်ရှိသော phosphorylated အမိုင်နိုအက်ဆစ်များသည် peptide အစီအစဉ်ကို တိုက်ရိုက်မိတ်ဆက်ပေးသည်-
ဆိုလိုသည်မှာ၊ phosphorylated လိုအပ်သောအမိုင်နိုအက်ဆစ်များသည် phosphorylated ဖြစ်ကာ (Thr,Ser သို့မဟုတ် Tyr) ကိုအသုံးပြု၍ ကြိုတင်ကာကွယ်ထားမည်ဖြစ်ပြီး၊ ထို့နောက် phosphorylation သည် ပုံမှန် SPPS မျိုးဆက်ဖြစ်စဉ်အပေါ်အခြေခံ၍ polypeptide အညွှန်းကိန်း၏ရွေးချယ်ရေးအမှတ်အထိ ကျဉ်းမြောင်းသွားမည်ဖြစ်သည်။ .ဤနည်းလမ်းသည်လည်ပတ်ရန်လွယ်ကူသည်၊ peptide လုပ်ငန်းများ၏ phosphorylated ပြုပြင်မွမ်းမံခြင်း၏အဓိကနည်းလမ်းဖြစ်လာသည်။
2) peptide အစီအစဥ်တွင် အစေးထုတ်ပေးပြီးနောက်၊ Ser hydroxy phosphorylation၊ Tyr သို့မဟုတ် Thr ဘေးထွက်ကြိုးများ-
ဘေးထွက်ကွင်းဆက်အလှဆင်ခြင်းတွင် အုပ်စုကြီးများမှ ထုတ်ပေးသော steric အတားအဆီးကြောင့် အမိုင်နိုအက်ဆစ်၏ phosphorylation သည် peptide ကွင်းဆက်နှင့်အတူ ကျုံ့ရန် ခက်ခဲသည်။အနာဂတ်တွင်၊ အထူးသဖြင့် phosphorylation sites အများအပြားပါဝင်သော အလှဆင်ခြင်းတွင် အမိုင်နိုအက်ဆစ်များ မိတ်ဆက်ခြင်းသည် ပို၍ခက်ခဲလိမ့်မည်၊ မျိုးဆက်သည် အလွန်ခက်ခဲလိမ့်မည်၊ နောက်ဆုံးထုတ်ကုန်ဖွဲ့စည်းမှုမှာ ရှုပ်ထွေးသည်၊ ခွဲရန်ခက်ခဲပြီး အထွက်နှုန်းမှာ အလွန်နည်းပါသည်။
ထို့ကြောင့်၊ peptide ကွင်းဆက်ရှိ ဆိုဒ်အများအပြားကို phosphorylated လုပ်သောအခါ၊ resin ပေါ်ရှိ peptide အစီအစဥ်ကို ထုတ်လုပ်ပြီး Ser, Tyr, သို့မဟုတ် Thr ၏ side chain hydroxyl အုပ်စုဖြင့် phosphorylate ပြုလုပ်နိုင်သည်- ၎င်း၏မျိုးဆက်တွင် အဓိကအားဖြင့် ရွေးချယ်ဖယ်ရှားခြင်းတွင် ပါဝင်ပါသည်။ peptide ပေါင်းစပ်ပြီးနောက် အမိုင်နိုအက်ဆစ်များကို အသိအမှတ်ပြုရန် လိုအပ်သော ဘေးထွက်ကွင်းဆက် အကာအကွယ်အုပ်စု။Tyr အတွက်၊ Thr သည် အမိုင်နိုအက်ဆစ်ဘေးထွက်ကြိုးများကို တိုက်ရိုက်အသုံးပြုနိုင်ပြီး တုံ့ပြန်မှုတွင် အကာအကွယ်မရှိပါ။
ဘေးထွက်ကွင်းဆက်ကာကွယ်ရေးအခြေခံ 1% TFA/DCM ပတ်ဝန်းကျင်ကို အရေအတွက်အလိုက် ဖယ်ရှားနိုင်သည်။ဤနည်းလမ်းကို ရွေးချယ်သောအခါ၊ hydroxyl အုပ်စုနှင့် ချိတ်ဆက်ထားသော dibenzyl phosphoramidite နှင့် tetrazolium တို့ကို အသုံးပြု၍ phosphoramidite tetrazolium တက်ကြွသော အလယ်အလတ်ကို ထုတ်ပေးနိုင်ပြီး၊ ထို့နောက် တုံ့ပြန်မှုပြီးမြောက်ရန် peroxyacid ပတ်ဝန်းကျင်တွင် phosphoryl အုပ်စုတစ်ခုအဖြစ် oxidized လုပ်နိုင်သည်။
စာတိုက်အချိန်- စက်တင်ဘာ-၀၈-၂၀၂၃